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木霉T-soybean ACCD酶功能分析

時間:2019-06-11 20:27來源:畢業論文
以木霉T-soybean為研究對象,對木霉T-soybean 1-氨基環丙烷-1-羧酸脫氨酶 (ACCD) 功能進行了分析。2.0mM/L 1-氨基環丙烷-1-羧酸(ACC)能明顯誘導ACCD酶活性。硫酸銨沉淀法對ACCD進行分離純化

摘要:本實驗以木霉T-soybean為研究對象,對木霉T-soybean 1-氨基環丙烷-1-羧酸脫氨酶 (ACCD) 功能進行了分析。2.0mM/L 1-氨基環丙烷-1-羧酸(ACC)能明顯誘導ACCD酶活性。硫酸銨沉淀法對ACCD進行分離純化,SDS-PAGE凝膠電泳結果表明,目的蛋白大小為37KDa,與預期結果一致。ACCD酶活性測定結果顯示,ACC濃度為2mM/L時誘導木霉ACCD活性高達2.52U/mL;由ACC誘導的木霉ACCD粗酶液處理玉米后,玉米的發芽率 (95%)、鮮重 (0.902g)、株高 (2.74cm)、根長 (4.17cm)、根數 (7條) 較對照都有顯著提高。對照玉米的發芽率為75%、平均鮮重為0.754g、平均株高為1.275cm、平均根長為2.71cm、平均根數為2.5條。結果表明ACCD酶對植物的發芽、生長具有明顯的促進作用。36225
畢業論文關鍵詞:木霉;1-氨基環丙烷-1-羧酸;功能分析
Functional Analysis of Trichoderma T-soybean
ACCD Enzyme
    Abstract: The experiment with Trichoderma T-soybean as the research object, of Trichoderma T-soybean 1-aminoanthraquinone ring propane - 1-tightening carboxylic acid deaminase (ACCD) function were analyzed. 1- -1- 2.0mM/L carboxylic acid (ACC) can induce the activity of ACCD. The ammonium sulfate precipitation method was isolated and purified, SDS-PAGE gel electrophoresis showed that the size of the target protein was 37KDa, and the results were in agreement with the expected results of the ACCD gel electrophoresis.. ACCD enzymes activity was determined. The results showed, ACC concentration is 2mM/L induced by Trichoderma ACCD activity up to 2.52U/mL; by the ACC induced by Trichoderma ACCD crude enzyme liquid of corn and Corn Germination rate (95%), fresh weight 0.902g, height 2.74cm) and the root length (4.17), root number (7 A) have significantly improved than that of the control. The germination rate of maize was 75%, the average fresh weight was 0.754g, the average height was 1.275cm, the average root length was 2.71cm, the average number was 2.5,The results showed that ACCD had a significant effect on the germination and growth of plants.
源`自*六:維.論^文'網www.mmeqir.tw

    Key words: ACC; Trichoderma T-soybean; Functional analysis
目    錄

摘  要    1
引言    2
1. 材料及方法    2
1.1 實驗材料及儀器    2
1.1.1 實驗材料及藥品    2
1.1.2 實驗儀器    2
1.2 實驗方法    3
1.2.1藥品的配制    3
1.2.2 木霉的活化    3
1.2.3 木霉ACCD的誘導    3
1.2.4 ACCD酶的分離純化    3
1.2.5 ACCD酶活性測定    4
1.2.6 SDS-PAGE凝膠電泳    4
1.2.7 ACCD酶對玉米發芽和生長的影響    4
2. 結果與分析    4
2.1 ACCD酶活性測定    5
2.2 SDS-PAGE凝膠電泳結果    5
2.3 ACCD酶功能驗證    6
2.3.1 分別用水和粗酶液處理對玉米種子發芽影響    6
2.3.2 分別用粗酶液和SM培養基處理對玉米發芽和生長影響    6
3. 結論與討論    9
參考文獻    10
致謝    12
木霉T-soybean ACCD酶功能分析
引言
在病害、鹽堿、礦物質缺乏以及不利的pH等條件下植物會產生過量的乙烯。乙烯對植物的生長、發育、衰老、器官脫落等起著重要調節作用,過量的乙烯會抑制植物根系的生長,進而抑制植物的正常生長,使植物的抗病能力降低[1]。乙烯的生物合成途徑:蛋氨酸→ S-腺苷蛋氨酸→ 1-氨基環丙烷-1-羧酸 (ACC) →乙烯[2-6],催化S-腺苷蛋氨酸生成ACC的1-氨基環丙烷羧酸脫氨酶 (ACCD酶) 是植物乙烯合成的限速酶,決定著乙烯的產生,也影響著植物的生長[7]。而木霉所產生的ACCD酶能夠切斷乙烯的前體ACC產生酮戊二酸和氨,從而降低乙烯含量,促進植物的生長,提高植物的抗病性[8-11]。因此,木霉ACCD酶在生物防治方面具有良好及廣泛的應用前景。 木霉T-soybean ACCD酶功能分析:http://www.mmeqir.tw/shengwu/20190611/34570.html
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